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苏州达麦迪生物医学科技有限公司

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Lowry 蛋白定量试剂盒,国产,现货,改良型
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产品: 浏览次数:694Lowry 蛋白定量试剂盒,国产,现货,改良型 
品牌: 通善
产品型号: Tb-3421
产品规格:
最小起订量: 1 盒
供货总量: 11111 盒
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2017-05-11 10:25
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详细信息

Tb-3421 Lowry 蛋白定量试剂盒 250 / 1000 assays 180 / 400
许多年来Lowry法是常用也是被引用次数多的蛋白质定量方法。其原理是在碱性条件和福林酚Folin-Ciocalteu Reagent存在下,铜离子与蛋白质形成可溶性兰色复合物,在750 nm有光吸收值。Lowry法的优点是灵敏度高,对脂质、SDS等干扰物质不甚敏感。经典Lowry法的主要缺点是,每次蛋白定量之前必须用两种不同的试剂A和B (Reagent A and B)新鲜配制碱性铜试剂(Reagent C)。碱性铜试剂(Reagent C)不稳定因而必须每天新鲜配制;另外,经典Lowry法产生的蛋白颜色复合物稳定性较差,在反应20-120分钟内变化9.2%;蛋白浓度低于15μg/ml时标准曲线的重复性较差;本试剂盒采用改良的Lowry法,用单一添加有稳定剂的碱性铜试剂代替经典Lowry法的试剂A、试剂B、和试剂C。这种改良碱性铜试剂在室温下稳定12个月以上;测定反应产生的铜蛋白-蓝色复合物相当稳定,在2小时内的变化不超过0.3%;反应曲线几乎与原有方案吻合,重复性佳。因而改良Lowry法蛋白定量试剂盒与BCA法蛋白质定量试剂盒一样,具有非常好的试剂稳定性、检测灵敏度、和重复性,并且测定过程变得十分简捷,是经典Lowry法忠实用户的理想选择。

保存:BSA蛋白标准品4℃保存有效期至少3个月,-20℃保存有效期至少一年,其他试剂室温保存有效期至少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存,Folin酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。

产品组成:  

Folin酚甲试剂A       

100ml×2

Folin酚甲试剂B

5ml  

Folin酚乙试剂(1N)

20ml

PBS稀释液

30ml

BSA蛋白标准品 (5mg/ml )        

1ml

                                                             

产品简介:

    Folin-酚试剂法包括两步反应:步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将Folin试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5~100μg/ml蛋白质。Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。

操作说明:

  1.根据需要量,取适量Folin酚甲试剂A和B按50:1混合,混合后有效期为24小时,过期失效。

  2.根据需要量,取适量BSA标准品用PBS稀释稀释10倍至浓度0.5mg/ml。

若采用酶标仪法(96)

  3.将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul加到96孔板中,加PBS补足到20ul。

  4.将样品作适当稀释(多做几个梯度),加20ul到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点误差比较大,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

  5.将配好的Folin酚甲试剂每孔加入200ul,轻轻震动,混匀,室温放置10分钟。

  6.各孔加入20微升Folin酚乙试剂,迅速混匀,37℃放置30分钟。用酶标仪测定A650计算蛋白浓度。

若采用分光光度计法(接上述步骤2)

  3.取八支(或者更多)5ml离心管,标号,按下表加入试剂。

  4.混匀,37℃放置30分钟。分光光度计测定A650计算蛋白浓度。

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