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实验收费标准
一、免疫组化实验：
1、一抗,二抗,DAB需要用户从我公司购买：10元/蜡块/抗体；8元/切片/抗体（不包括试剂费）
2、用户不订试剂，用我公司的试剂：60元/蜡块/抗体
二、图像分析:
1、采图：20张收费300元/指标，30张收费400元/指标（图像放大倍数以用户要求为准，我公司一般是：100倍和400倍）
2、免疫组化评分：400元/指标/20张图片(结果包括采图及分析，提供电子版表格)
三、其他实验：
1、石蜡包埋：10元/蜡块
2、HE染色：6元/片
3、脱钙：60元/标本(脱钙标本免除包埋费)
4、特殊染色：60元/片子
需要我们提供技术服务的单位和个人请先下载《试验申请表》，按要求填写后发到Email：tosciencebio@126.com或者发QQ：1853667575，其他事宜请拨打服务热线：400-876-8869
一 免疫组化（LP 法）操作步骤
1． 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行
⒉ 缓冲液洗 3min/2 次。
⒊ 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色，将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。
⒋ 缓冲液洗 5min/2 次。
⒌ 滴加 Ultra V Block ， 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。
（注：孵育不要超过 10 分钟，否则会导致特异性染色降低。如果一抗的稀释液中含有 5 － 10% 正常羊血清，这一步可以省略。）
⒍ 缓冲液洗 5min/2 次。
⒎ 滴加一抗工作液 37 ℃孵育 1 － 2 小时。（具体孵育时间和温度由试验者最终决定）
⒏ 缓冲液洗 5min/2 次。
9 ． 滴加 Primary Antibody Enhancer（增强子），在室温下孵育 20 分钟。
10 ．缓冲液洗 5min/2 次。
11 ．滴加 HRP Polymer（酶标二抗） ，在室温下孵育 30 分钟。
（注：HRP Polymer 对光敏感，应避免不必要的光暴露并储存在不透明的小瓶中。）
12 ．缓冲液洗 5min/2 次。
13 ．向 1ml DAB Plus Substrate （或 AEC Plus Substrate) 中滴加 1-2 滴 DAB Plus Chromogen （或 AEC Plus Chromogen），混匀后滴加到切片上，孵育 3 － 15 分钟。（具体时间由染色深浅决定。）
14 ．自来水充分冲洗，复染，脱水，透明，封片。
二．免疫组化操作步骤
⑴、石蜡切片脱蜡至水。
⑵、 3%H 2 O 2 室温孵育 5-10 分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。
⑶、蒸馏水冲洗， PBS 浸泡 5 分钟 x2 （如需抗原修复，可在此步后进行）。
⑷、 5-10% 正常山羊血清（PBS 稀释）封闭，室温孵育 10 分钟，倾去血清，勿洗。滴加 一抗 工作液， 37 ℃ 孵育 1-2 小时或 4 ℃ 过夜。
⑸、 PBS 冲洗， 5 分钟 x3 次。
⑹、滴加适量 生物素标记二抗 工作液， 37 ℃ 孵育 10-30 分钟。
⑺、 PBS 冲洗， 5 分钟 x3 次。
⑻、滴加适量的 辣根酶或碱性磷酸酶标记的链霉卵白素 工作液， 37 ℃ 孵育 10-30 分钟。
⑼、 PBS 冲洗， 5 分钟 x3 次。
⑽、显色剂显色 3-15 分钟（DAB 或 NBT/BCIP）
⑾、自来水充分冲洗，复染，脱水，透明，封片。
三. 免疫组化染色步骤
冰冻切片 4-8um ，室温放置 30 分钟后，入 4 ℃丙酮固定 10分钟，PBS洗，5分钟x3，用过氧化氢孵育5-10分钟，消除内源性过氧化物酶的活性。
免疫组化结果的判定和分析
免疫组化染色（IHC）
从免疫组化结果而言，免疫组化技术服务主要涉及抗体免疫组化结果的描述与分析，图片的确定与选取，相关数据的提供，上述工作是免疫组化工作的重点内容，只有严格的免疫组化设计，标准的免疫组化操作，专业化的结果分析才能更好的满足客户的要求，这点对于形式为腹水，上清，培养液之类的抗体显得更为重要。关于上述服务内容应该在免疫组化开始前由双方明确，一般而言，客户方免疫组化前应提出需要什么样的结果与分析，例如是简要还是详细的描述免疫组化结果，需要免疫组化数据否，图片的数量与规格等。如果为双盲试验或有第三方参与，则事先申明。
意义
近年来，随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现，使许多疑难得到了明确诊断。在常规病理诊断中，5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可，其在低分化或未分化的鉴别诊断时，准确率可达50%-75%。