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TEV Protease大量现货！
产品概述
TEV Protease (烟草蚀纹病毒蛋白酶；Tobacco etch virus protease) 是来源于烟草蚀纹病毒(TEV) Nla的重组蛋白酶，此蛋白酶被用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签。TEV蛋白酶具有很强的位点特异性，能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly)，普通的是ENLYFQG，其切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间。该酶在PH 5.5-8.5和4-30℃的广泛范围内皆有活性，使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而修改。该酶带有His-sumo Tag经6×His标签纯化，剪切反应完毕后可通过Ni-NTA（产品货号：PAN001）去除。本蛋白酶来源于大肠杆菌重组表达。
酶活性单位定义
在1X TEV Buffer (50 mM Tris-HCl, pH8.0, 0.5 mMEDTA, 1mM DTT) 中，30℃条件下反应 1 小时，能够切割 3 µg 的反应底物达 85%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
产品溶液组分
| TEV protease储存液 | 10 Cleavage Buffer |
|---|---|
| 25 mM Tris-HCl，pH 8.0 | 500 mM Tris-HCl，pH 8.0 |
| 150 mM NaCl | 5 mM EDTA |
| 1 mM EDTA | 10 mM DTT |
| 5 mM DTT | |
| 50%（V / V）Glycerin |
推荐反应体系
| 反应物组成 | 体积 |
|---|---|
| 融合蛋白 | 50 µg |
| TEV Protease | 2 µl（10 U/µl） |
| 10 TEV Buffer | 10 µl |
| ddH2O | 至100 µl |
不同温度下的参考反应时间：
- 4℃反应 16 小时
- 20℃反应 6 小时
- 30℃反应 2 小时
活性测试
待测融合蛋白100µg，加入TEV protease 2µl，4℃反应 16 小时，取酶切前后样品SDS-PAGE检测，如右图所示 >90% 融合蛋白被切割。
储存条件
长期储存于-80℃，可保存 2 年；或小量分装后保存于-20℃，可保存6 个月，避免反复冻融。10 TEV Buffer 置于-20℃保存。
包装规格
| 货号 | 规格 |
|---|---|
| RPP002-100 | 100 U |
| RPP002-500 | 500 U |
| RPP002-2000 | 2000 U |