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苏州达麦迪生物医学科技有限公司

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Ni-NTA HRP,现货
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产品: 浏览次数:303Ni-NTA HRP,现货 
品牌: 上海/Toscience
产品型号: MN002
产品规格:
最小起订量: 1 支
供货总量: 11111 支
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2017-05-11 10:25
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详细信息

50ul和200ul两种包装,大量现货。
NTA-辣根过氧化物酶
(NTA-HRP)
产品说明
Ni-NTA HRP 是由Ni-NTA 共价偶联HRP 后得到,每个HRP 共价结合2-3 个Ni-NTA,Ni-
NTA 可以高特异性结合6xHis 标签。该产品可以广泛用于ELISA、Western Blotting、免疫组化
等试验,用以特异性检测6xHis 标签。这种产品简化了检测6xHis 标签的操作,实现了一步检
测,特别是在以小鼠为宿主的标签蛋白检测中,可以避免小鼠抗体引起的交叉反应。
产品优势
· 简化实验步骤,无需二抗,一步完成
· 节约了时间,同时免去了多步反应所需的优化步骤
· 避免小鼠抗体引起的交叉反应
产品浓度和储存
1mg/mL ,含50%甘油(PBS); -20℃,保存2 年
使用方法
1. ELISA 实验中,1:1000-10000 稀释使用;Western Blotting、免疫组化实验中,建议
1:100-2000 稀释使用。
2. 封闭液:封闭液应该选用1%BSA/TBST 缓冲液,避免用牛奶;
3. 缓冲液成分:应该避免EDTA、咪唑或者其他二价金属离子;
4. 在 WB 实验中,如果需要去除膜上的NTA-HRP,只需要把浸入100mM咪唑,震荡洗
涤30 分钟,然后用缓冲液洗涤即可,非常简单方便;
注意事项
· 避免和EDTA 等金属螯合剂共同使用,这类试剂会螯合Ni-NTA 中的镍离子,影响
NTA 和6xHis 的结合;
· 咪唑同样会和镍离子结合,缓冲液中含有咪唑会影响NTA 和6xHis 的结合;
· 信号没有或者太弱:1)6xHis 没有充分暴露,WB 可以在转膜后用巯基乙醇和6M 尿
素处理膜,然后在加NTA-HRP,Elisa 可以在包板前,先对蛋白加入巯基乙醇后加热
处理;2)目标蛋白或者NTA-HRP 量太少,应增加用量,延长反应和曝光时间;
· 背景太高:1)封闭不彻底;2)目标蛋白或者NTA-HRP 量太多;
· 杂带:1)WB 高分子量杂带,处理样品不彻底,应该加入DTT 并煮沸处理;2)目标
降解产生低分子量杂带;
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