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| Tb-3105 | 磷酸化蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 600 |
| Tb-3105A | 磷酸化蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,000 |
由于产品不断优化更新，请以实际收到的产品说明书为准！
产品组成：
磷酸化蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取磷酸化蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的配方能充分保护磷酸化蛋白的磷酸化，够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
产品特点：
1、 使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
3、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
储存条件： 蛋白酶抑制剂-20℃保存； 蛋白提取液2-8℃保存。
有效期： 一年。
产品组成：
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产品组成
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Tb-3105
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Tb-3105A
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规格
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50 assays
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100 assays
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Buffer I
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25ml
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50ml |
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蛋白酶抑制剂混合物
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100ul
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200ul
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储存条件：
-20℃保存。
有效期：
一年。
注意事项：
1. 旋帽离心管装的微量试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
3. 整个过程须保持样品处于低温状态。
4. 不论是细胞或组织样本，应充分保证蛋白样本的新鲜。组织离体后应当立即放到液氮中保存，长期保存的话也在液氮中（如果无液氮条件则放置-80℃）。
5. 避免蛋白的反复冻融。
6. 电泳buffer中也可加入Na3VO4。
7. 本提取配方中含有蛋白激酶及磷酸酶这两种酶的抑制剂，因此不能用于蛋白激酶和磷酸酶这两种酶的免疫共沉淀实验。
产品简介：
本试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体软组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取具有活性的磷酸化蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。该试剂盒含有的酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等蛋白研究。
产品特点：
1、 从细胞，组织中提取蛋白不需要经过前处理。
2、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
3、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
使用方法：
A．细胞磷酸化蛋白提取
1. 裂解液制备：每500ul冷的Buffer I中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
3. 用预冷的PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5×106个细胞中加入500ul冷的裂解液，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
5. 在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到磷酸化蛋白。
B． 组织磷酸化蛋白提取
1. 裂解液制备：每500ul冷的Buffer I中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取100mg组织样本剪碎，用液氮研磨后，加入裂解液。（如果没有条件液氮研磨，也可用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。）
3. 将组织的裂解液（或组织匀浆）吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到磷酸化蛋白。
上述磷酸化蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。