尿嘧啶DNA糖基化酶Uracil-DNA glycosylase(UNG酶)
产品概述
UNG酶可选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键,对RNA无活力,主要应用于PCR扩增产物的防污染。本UNG酶是自E.coli 表达、纯化的重组蛋白酶。
酶活性单位定义
在37℃条件下反应 1小时,从含有dU的双链或单链DNA中底物中释放1nmolde 的dU 所需要的酶量为一个活性单位。
酶储存缓冲液
20 mM Tris-HCl buffer containing 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50 mM NaCl and 50% glycerol (v/v), pH 7.5
使用说明
Taq酶与UNG酶的反应缓冲液和酶储存液可以通用,一个50uL的反应体系,通常加入0.2-1U。
酶纯度
> 95%, as determined by SDS-PAGE(未检测到DNA内切酶和外切酶活力),94℃处理2分钟,UNG酶完全失去活力。
PCR反应体系配制实例
反应液组分 | 加量 |
---|---|
5X PCR Buffer | 5 µl |
dU plus dNTP Mix | 1 µl |
Primer1(10 µM) | 0.5 µl |
Primer2(10 µM) | 0.5 µl |
Taq | 0.3 µl |
UNG | 0.2-0.5 µl |
模板(含尿嘧啶的DNA) | 1 µl |
蒸馏水 | 至25 µl |

结果
M:5000 bp DNA Ladder Marker
Lane 1 - 4: 0.2-0.5µL UNG酶
Lane 5: 不加UNG酶
结果显示:不加UNG酶,含尿嘧啶的DNA模板能扩增出特异条带;添加不同浓度梯度的UNG酶,都能很好的去除含尿嘧啶的DNA。
包装规格
货号
规格(5U/µL)
RPE001-100
100 µL
RPE001-500
500 µL
货号 | 规格(5U/µL) |
---|---|
RPE001-100 | 100 µL |
RPE001-500 | 500 µL |